朱玉贤现代分子生物学考研视频材料！
（1）精讲教材中心考点。依照教材华章规划，说明教材的重难常识点。
（2）串讲名校考研真题。经过分析历年考研真题，收拾出题规则和特征，分析名校考研真题出题思路。
思考到课时的需要以及有关常识点的难易程度，关于一些简略的、考试不易触及的常识点，本课程不予以叙说或一带而过，故主张在学习本课程之条件前温习一遍教材。
吕俊鸟，北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学专业博士。在教育方面，首要教学生物化学、分子生物学、细胞生物学等生物学专业课程，并多次进行自考、考研辅导等培训，参加编写生物类考研辅导书，具有丰厚的讲课经历；在科研方面，参加教育部等多项国家要点项目或严峻课题，具有厚实的理论基础基础和实习经历，宣告数篇sci论文。
授课特征：思维逻辑清楚，说明详尽透彻，注重各常识点的畅通领悟贯穿。
第1章序文
第2章染色体与dna（1）
第2章染色体与dna（2）
第2章染色体与dna（3）
第3章生物信息的传递（上）（1）
第3章生物信息的传递（上）（2）
第3章生物信息的传递（上）（3）
第4章生物信息的传递（下）（1）
第4章生物信息的传递（下）（2）
第4章生物信息的传递（下）（3）
第4章生物信息的传递（下）（4）
第4章生物信息的传递（下）（5）
第5章分子生物学研讨法（上）（1）
第5章分子生物学研讨法（上）（2）
第6章分子生物学研讨法（下）
第7章原核基因表达调控（1）
第7章原核基因表达调控（2）
第7章原核基因表达调控（3）
第8章真核生物基因表达调控（1）
第8章真核生物基因表达调控（2）
第8章真核生物基因表达调控（3）
朱玉贤现代分子生物学视频全套有些标题之一：
一、选择题
①测定蛋白质在dna上的联系部位的常见办法是（）。[中山大学2008研]
a.western印迹
b.pcr
c.捆绑性图谱分析
d.dnase i维护足印分析
【答案】d
朱玉贤现代分子生物学视频全套参阅：a项，westerm印迹是指将蛋白质经凝胶电泳转移到固相载体上，使用抗体检测意图蛋白的办法。b项，pcr是体外扩展扩增特定的dna片段的分子生物学技能。c项，捆绑性图谱分析是对同一dna用不一样的捆绑酶进行切开，然后获得各种捆绑酶的切开位点，由此树立的位点图谱有助于对dna的规划进行分析。d项，dnasei维护足印分析可检测rna聚合酶等蛋白质在dna上的联系位点，它不只能找到与特异性dna联系的方针蛋白，而且能招认方针蛋白联系碱基部位的方位。因而答案选d。
朱玉贤现代分子生物学视频全套有些标题之二：
2②研讨promoter dna与蛋白质及rna聚合酶分子之间彼此作用不合适的办法是（）。
[我国科学技能大学2005研]
a.dna footprinting b.dna fingerprinting c.gel mobility assay（gel shift assay）
d.run off transcription
【答案】b
朱玉贤现代分子生物学视频全套参阅：a项，dna footprinting即dna脚印实验，可检测蛋白质在dna上的联系位点，找到与特异性d
na联系的方针蛋白，并招认方针蛋白联系在哪些碱基部位。b项，dna fingerprinting即dna指纹印迹，用于研讨dna序列之间的类似性。c项，gel mobility assay（gel shift assay）即凝胶阻滞实验，又称dna搬场率改变实验，是体外分析dna与蛋白质彼此作用的一种特别的凝胶电泳技能。d项，run off transcription即连续转录，是检测建议子强度和转录开始位点的分子生物学实验办法，首要是rna聚合酶与模板的结协作用。
因而答案选b。
三、判别题
①western杂交的目标是蛋白质。（）[场州大学2021研]
【答案】对
②sds-page时，不一样巨细蛋白质分子的电荷/质量比值趋近于相同。（）[中山大学2009研]
【答案】对
朱玉贤现代分子生物学视频全套参阅：sds与蛋白质联系带来两个成果：①因为sds是阴离子，使多肽链掩盖上相同的负电荷，该电荷量远跨越蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不一样蛋白质间原有的电荷不一样，使一切的sds-蛋白复合体电泳时以相同的电荷/蛋白质质量比向正极移动。②改动了蛋白质单体分子的构象。因而在sds-page中，一切蛋白质分子的电荷/质量比值根柢相同，搬场速率只和蛋白质的分子巨细有关。
四、名词说明题
1]基因组修改技能[安徽师范大学2021研]
朱玉贤现代分子生物学视频全套参阅：基因组修改技能是一种可以在基因组水平上对dna序列进行改造的遗传操作技能。一般可在基因组水平上对意图基因序列甚至是单个核苷酸进行替换、删去，添加或刺进外源dna序列。基因修改技能中，zfn和talen为代表的序列特异性核酸酶技能可以高功率地进行定点基因组修改，而crispr/cas9体系作为最新一代基因修改技能，可以简练高效地完成基因组精确润饰。
五、简答题
①简述免疫共堆积的概念，原理和优缺陷。[我国科学院研讨生院2013]
朱玉贤现代分子生物学视频全套参阅：（1）免疫共堆积的概念
免疫共堆积是以抗体和抗原之间的专注性作用为基础的用于研讨蛋白质彼此作用的经典办法，该办法能断定两种蛋白质在无缺细胞内的生理性彼此作用。
（2）免疫共堆积的原理
若两个蛋白可以发生特异性彼此作用，那么当用靶蛋白的抗体进行免疫堆积时，另一个蛋白也会被一起堆积下来。
（3）免疫共堆积的优缺陷
①利益
a.彼此作用的蛋白质都是经翻译后润饰的，处于天然状况；
b.蛋白的彼此作用是在天然状况下进行的，可以避免人为的影响；
c.可以别离得到天然状况的彼此作用蛋白复合物。
②缺陷
a.活络度不高，可以检测不到低亲和力的和片刻间的蛋白质-蛋白质彼此作用；
b.两种蛋白质的联系可以不是直接联系，可以有第三者在中心起桥梁作用；
c.有必要在实验前猜测意图蛋白是啥，以选择最终检测的抗体，所以若猜测不正确，实验就得不到成果，该办法本身具有冒险性
朱玉贤现代分子生物学视频全套有些标题之五：
③简述酵母双杂交的原理及使用。[河北大学2012研]
有关试题：酵母双杂交原理是啥？可以使用于哪些方面的研讨？[电子科技大学2009研]
朱玉贤现代分子生物学视频全套参阅：
（1）酵母双杂交的原理
①转录激活因子在规划上是组件式的，即这些因子一般由两个或两个以上彼此独立的规划域构成，包括dna联系规划域（bd）和转录激活规划域（ad），bd和ad是转录激活因子发扬功用所必需的，且二者彼此独立，功用互不影响。单独的bd能与特定基因的建议区联系，但不能激活基因的转录，需要和ad联系构成杂蛋白今后，才发扬无缺的转录激活活性，使下流基因得以转录。
②将两个待研讨的蛋白（x、y）别离与质粒的bd、ad规划域交融（bd-x表达钓饵蛋白，一般钓饵蛋白为已知蛋白；ad-y是猎物，猎物可认为cdna文库、基因片段或基因骤变体等），将构建好的两个质粒转入同一酵母细胞中表达，若两蛋白之间不存在彼此作用，则下流基因（陈述基因）不会表达；若两蛋白之间存在彼此作用，则bd与ad在空间上很接近，陈述基因得以表达。经过陈述基因表达与否来判别两蛋白之间是不是存在彼此作用。
（2）酵母双杂交的使用
①用于研讨蛋白质与蛋白质之间的彼此作用。
②用于发现新的蛋白质和蛋白质的新功用。
③用于在细胞体内研讨抗原和抗体的彼此作用。
④用于疾病发生机制的研讨和药物的开发。
⑤用于树立基因组蛋白连锁图。
⑥用于断定蛋白质彼此作用的规划域或活性位点。
原核基因表达调控的首要特征
（1）操作子的调控
原核基因一般经过操作子机制来完成基因表达调控，如乳糖操作子、色氨酸操作子以及阿拉伯糖操作子等。
①乳糖操作子是负控诱导体系。②色氨酸操作子是负控阻挡体系。
（2）转录开始期间的调控
转录开始是基因表达调控的要害环节。
（3）转录中止期间的调控
该期间的调控一般包括抗中止作用和弱化作用。抗中止因子是指可以阻挡转录中止的蛋白。一般在中止子上游具有抗中止子作用信号。
（4）转录后调控
原核生物转录后调控首要是指在翻译或许翻译后水平前进行“微调”，首要包括mrna本身规划元件对翻译开始的调度、反义rna对翻译的调控、稀有密码子对翻译的影响以及翻译阻挡等表象。
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